Introdução: O carcinoma prostático usual corresponde a uma das principais neoplasias malignas que acomete o sexo masculino, sendo a primeira causa de morte por câncer em homens acima de 75 anos. É a segunda neoplasia maligna mais comum entre os homens, perdendo apenas para os cânceres de pele. No Brasil, tem-se observado um aumento na incidência desta entidade, que pode estar relacionado à evolução dos métodos diagnósticos e melhoria na qualidade dos sistemas de informação. Um dos fatores prognósticos desse tumor é a quantidade de células-tronco neoplásicas no microambiente tumoral, devido à sua associação com resistência terapêutica e capacidade de metastatização. Os fitocanabinoides compreendem cerca de 100 substâncias oriundas da planta Cannabis sativa L., sendo os mais utilizados para fins terapêuticos, o Δ9–tetra-hidrocanabinol (Δ9-THC) e o canabidiol (CBD). Seus homólogos endógenos juntamente com receptores e enzimas relacionados constituem o sistema endocanabinoide coordena e integra diferentes órgãos/tecidos do corpo humano. São conhecidas as propriedades neuroprotetora, anti-inflamatória e antioxidante do canabidiol e, ensaios mais recentes apontam para uma ação antineoplásica significativa, dificultando o crescimento tumoral, angiogênese e surgimento de metástase. Objetivos: avaliar os efeitos citotóxicos, antiproliferativos, pró-apoptóticos e anti-células-tronco neoplásicas (CTN) do canabidiol em duas linhagens celulares contínuas de câncer de próstata humano (PC3 e LNCAP) e uma derivada de células epiteliais prostáticas normais (RPWE), comparando-o à doxorrubicina. Métodos: foram realizados ensaios de viabilidade celular (MTT), imunocitoquímica para Ki67 (antiproliferação), análise do índice de cariorrexe/cariopicnose (apoptose), detecção de ALDH-1 e c-Kit (marcadores de CTN). Os resultados foram comparados entre grupos tratados com CBD Full, Broad ou com doxorrubicina. Resultados: os CBDs mostraram efeito citotóxico em todas as linhagens, com IC50 < 15µg/mL, atendendo ao critério do National Cancer Institute para atividade antineoplásica in vitro. Parte desse efeito decorreu de inibição da proliferação celular (redução de Ki67) e redução da expressão de marcadores CTN Conclusão: este estudo demonstra o potencial antineoplásico e anti-CTN de duas nanoformulações de CBD em linhagens contínuas de epitélio prostático humanas. Seus efeitos citostáticos e citotóxicos, sugerem que o CBD possa ser considerado como um agente adjuvante em estratégias terapêuticas para neoplasias linfoides.