A deleção da subunidade α7nAChR em neurônios POMC hipotalâmicos altera a homeostase glicêmica em camundongos jovens.

RESUMO

INTRODUÇÃO: A subunidade alfa 7 do Receptor Nicotínico Colinérgico (α7nAChR) é expressa em diversos tipos celulares, participando no desenvolvimento da resposta anti-inflamatória colinérgica. Enquanto no sistema nervoso central, em especial, no hipotálamo, tem sido descrita sua participação na manutenção da homeostase energética através da modulação de neuropeptídeos. Além disso, estudos demonstraram que a subunidade α7nAChR tem um papel constitutivo na manutenção do controle glicêmico. Nesse sentido, a sua deleção está envolvida com a redução da massa de células pancreáticas do tipo β, déficit na captação de glicose muscular e resistência à insulina, através do ipGTT e ipITT. Assim, o presente resumo tem como objetivo investigar a participação da subunidade α7nAChR expresso em neurônios POMC hipotalâmicos no âmbito da manutenção da homeostase glicêmica em camundongos jovens.

OBJETIVOS: O presente resumo tem como objetivo investigar a participação da subunidade α7nAChR expresso em neurônios POMC hipotalâmicos no âmbito da manutenção da homeostase glicêmica em camundongos jovens.

MÉTODOS: Foram utilizados animais machos com deleção da subunidade α7nAChR em neurônios POMC hipotalâmicos (α7nAChRfloxPOMCcre) ou não (α7nAChRflox) alimentados com dieta padrão (ração comercial). Na 4ª semana de vida, os animais passaram por jejum overnight (12h), seguido por realimentação (2h) e um novo jejum (4h). Então, foram realizados os testes de tolerância intraperitoneal à glicose (ipGTT; 1g/kg de peso corporal) e a insulina (ipITT; 1,5UI/kg de peso), a glicemia de jejum foi mensurada após 12h. Para a avaliação da sinalização envolvida na homeostase glicêmica, foi coletado o fígado de animais em jejum (12h). A extração de RNA foi realizada a partir do reagente TRIzol (Sigma Aldrich; T9424). A expressão gênica foi realizada por RT-qPCR, sendo os genes alvo: Pck1, G6Pc, IRS1, Akt, PI3KCa, PTEN, PTPN1 e Prkaa2. Enquanto no Western Blotting, até o momento, foram investigadas as proteínas: IRS, pAKT, AKT, PI3K, G6pase e PEPCK.

RESULTADOS: Para a análise da homeostase glicêmica, não houve diferença na glicemia em jejum entre os grupos. Contudo, na 4ª semana os animais α7nAChRfloxPOMCcre apresentaram o aumento na AUC (242,9±37,06 vs 330,8±23,72) e redução no kITT (2,19±0,19 vs 1,58±0,21) comparado ao controle. Na curva do ipITT houve uma redução pontual na glicemia aos 5 minutos. Na análise de expressão de genes da via de sinalização hepática da insulina, responsáveis pela manutenção da homeostase glicêmica, o grupo α7nAChRflox POMCcre apresentou o aumento do PI3KCa (100,0±4,768 vs 175,9±16,99) e redução da Akt (100,0±5,636 vs 71,86±5,664) comparado ao controle. Por outro lado, os demais genes não apresentaram diferença entre grupos. Posteriormente, foram investigadas as proteínas envolvidas na sinalização hepática da insulina na 4ª semana de vida. No grupo α7nAChRflox POMCcre, houve o aumento do substrato do receptor de insulina (IRS) (100,0±31,10 vs 203,3±29,03), enquanto proteínas downstream como PI3K (100,0±18,38 vs 55,75±6,831) e Akt (100,0±8,362 vs 77,06±6,392) foram reduzidas, comparado ao grupo controle. As demais proteínas avaliadas não apresentaram diferença entre grupos.

CONCLUSÃO: Diante do exposto, à deleção da subunidade α7nAChR em neurônios POMC hipotalâmicos prejudica a sinalização da insulina e consequentemente à homeostase glicêmica em animais jovens.

PALAVRA-CHAVE: controle glicêmico